FISH – аббревиатура, которая расшифровывается как fluorescence in situ hybridization, или флуоресцентная гибридизация In situ. Этот метод диагностики основан на применении ДНК-зондов со специальными метками. Они связываются с определенными участками хромосом и заставляют их светиться при изучении под флуоресцентным микроскопом.
Исследование FISH часто используют для выявления добавочных копий гена HER2 при раке молочной железы. Этот ген кодирует белок HER2/neu – рецептор эпидермального фактора роста 2 типа, который находится на поверхности клеток и, активируясь, заставляет их размножаться. Из-за дополнительных копий гена образуется больше белка, и это способствует бесконтрольным клеточным делениям при раке.
В настоящее время существуют таргетные препараты, которые блокируют белок HER2. Например, при раке груди часто применяют трастузумаб (Герцептин). Таким образом, определение HER2-статуса с помощью флуоресцентной гибридизации in situ помогает подобрать оптимальное лечение.
Интеллектуальная собственность https://www.euroonco.ru
Для чего проводят анализы методом FISH?
Активность гена HER2 повышена при 25–30% злокачественных опухолей молочной железы. Это важный показатель, который позволяет прогнозировать, будет ли рак реагировать на те или иные противоопухолевые средства.
Таргетные препараты, блокирующие HER2, будут работать, только если в злокачественных клетках есть этот белок. Это поможет сильно улучшить прогноз. Кроме того, при HER2-позитивном раке более эффективны некоторые химиопрепараты, хотя они и не действуют напрямую на белок-рецептор.
- HER2-статус рекомендуется проверять для каждого вновь диагностированного инвазивного рака молочной железы, поскольку результаты этого теста сильно влияют на тактику лечения.
- Всякий раз, когда рак груди распространяется или образует метастазы, рекомендуется повторно проверить HER2 статус, так как он может измениться.
В каких случаях проводят FISH-тест?
Самый простой и доступный метод оценки активности HER2 – иммуногистохимический анализ или иммуногистохимия (ИГХ). Этот тест основан на выявлении белка с помощью антитела, которое с ним специфически связывается. Преимущество метода FISH в более высокой точности, но в первую очередь проводят именно иммуногистохимию. По результатам ИГХ опухолевая ткань получает оценку в баллах:
- 0+: рак однозначно HER2-негативный. Соответствующие таргетные препараты будут неэффективны.
- 1+: рак HER2-негативный. Обычно ингибиторы HER2 неэффективны при таких опухолях, но исследования показывают, что некоторые помогают в ряде случаев.
- 2+: сомнительный результат.
- 3+: рак HER2-позитивный. Таргетная терапия, скорее всего, будет эффективна.
FISH-тест назначают при сомнительном результате.
Некоторые злокачественные опухоли груди получают по результатам ИГХ оценку 1+ или 2+, а результат FISH-теста отрицательный. Это так называемый рак с низким уровнем HER2. В настоящее время ученые продолжают его исследовать, по предварительным данным он чувствителен к определенным ингибиторам HER2.
Ранняя диагностика рака груди с применением данного метода не проводится. Для анализа нужна опухолевая ткань, поэтому его назначают женщинам, у которых опухоль уже обнаружена, после биопсии или хирургического удаления новообразования. Параллельно проверяют наличие рецепторов к гормонам. Всё это помогает подобрать правильное лечение.
Подготовка к исследованию
Чтобы провести тест на присутствие и активность рецептора HER2, нужен образец опухолевой ткани. Обычно можно использовать тот же материал, который был получен во время биопсии для гистологического исследования. Но в некоторых случаях биопсию нужно повторить:
- если образовались отдаленные метастазы – в них могли произойти новые мутации, которых не было в первичной опухоли;
- если заболевание рецидивировало после успешного лечения;
- в других случаях, когда врач сочтет это необходимым.
Предварительно всегда проводят иммуногистохимию – она помогает быстрее и с меньшими финансовыми затратами оценить статус HER2/neu. FISH-тест назначают при сомнительном результате (2+).
Как проводят FISH-тест?
Для исследования используют специальные ДНК-зонды, которые связываются с определенными участками хромосом – в данном случае теми, где находится ген HER2. К зонду прикреплена специальная метка – в дальнейшем ее можно обнаружить при изучении материала под флуоресцентным микроскопом.
Ген HER2 находится в хромосоме №17. Флуоресцентная гибридизация in situ помогает обнаружить как изменение числа целых хромосом, так и дополнительные копии гена.
Так выглядят под флуоресцентным микроскопом клетки, обработанные ДНК-зондом. Красные точки – это сигналы от гена HER2. A – отсутствие дополнительных копий гена HER2. B – имеются дополнительные копии HER2.
Преимущества и недостатки метода FISH
Флуоресцентная гибридизация in situ позволяет с высокой точностью выявить добавочные копии гена HER2. В первую очередь это нужно, чтобы определить, будет ли пациент реагировать на лечение современным таргетным препаратом трастузумабом (Герцептин). Согласно некоторым публикациям в научной литературе, при начале терапии данным препаратом на ранних стадиях заболевания удается на 50% сократить вероятность рецидива заболевания и на 30% снизить показатели смертности.
При этом трастузумаб действует только на клетки, в которых повышен уровень белка HER2. Таким образом, FISH играет большую роль в подборе оптимальной противоопухолевой терапии.
Еще одно преимущество метода – возможность выполнить его довольно быстро, от 3 до 7 дней. Также он обладает высокой точностью: чувствительность и специфичность составляют более 90%.
К минусам метода можно отнести его довольно высокую стоимость: для проведения анализа требуется специальный флуоресцентный микроскоп и расходные материалы. Цена исследования для пациента, соответственно, тоже довольно высока, но полностью себя оправдывает. К тому же, FISH-тест не нужно назначать всем подряд. Зачастую с определением HER2-статуса опухоли хорошо справляется иммуногистохимия. Флуоресцентная гибридизация нужна только в определенных случаях. В конечном счете она помогает подобрать оптимальную противоопухолевую терапию и улучшить прогноз для пациента.
Стоимость
Из прайса вы сможете узнать стоимость услуг в клиниках «Евроонко»:
- Консультация онколога-маммолога — 5 100 руб.
- Консультация химиотерапевта — 6 900 руб.
- Определение HER2 статуса опухоли методом FISH — 41 400 руб.
- Проведение иммунотерапии (без стоимости лекарственных препаратов) — 26 700 руб.
- Проведение химиотерапии (инфузия, без стоимости лекарственных препаратов) — 26 700 руб.
